PCR (Polimeraz Zincir Reaksiyonu), DNA’ların belirli bir hedef bölgenin milyonlarca kopyasının üretilmesini sağlayan moleküler bir tekniktir. PCR’ın temeli, DNA polimeraz enziminin kullanımına dayanmaktadır. DNA polimeraz, DNA şablonunun üzerine serbest nükleotitlerin eklenmesini katalizleyen bir enzimdir. PCR’da, DNA örneğinin çift iplikleri ayrıştırılır ve ardından özel olarak tasarlanmış primer denilen kısa DNA parçaları şablon DNAsına bağlanır. Primerler, hedef bölgenin her iki yanında yer alır ve DNA polimerazın ikili iplikleri sentezlemesine olanak sağlar.
PCR’ın ilk adımı, PCR karışımında bulunan DNA’nın ısıtma ile denatürasyonunu içerir. Bu işlemde, DNA çift iplikleri ayrıştırılır ve tek iplikli DNA yüzeye çıkar. Daha sonra, karışıma primerler eklenir ve soğutma ile primerlerin şablonla uyumlu olarak bağlanmasına izin verilir. Primerlerin bağlandığı şablon DNA, DNA polimeraz enziminin etkisiyle ikili ipliklerin sentezlenmesiyle sonuçlanır.
PCR’ın bir sonraki adımı, ikili ipliklerin sentezlenmesi için bir DNA polimerazın kullanılmasını içerir. Bu enzim, primerlerin bağlandığı şablona bağlanır ve her primerin üzerine serbest nükleotitler ekler. İlk PCR döngüsü tamamlandığında, her bir ikili iplik, iki yeni ikili ipliğe bölünür. Bu süreç, her bir döngüde katlanarak artar ve milyonlarca hedef DNA kopyası üretilir.
PCR, çeşitli alanlarda kullanılan güçlü bir moleküler biyoloji aracıdır. Genetik analizlerde, genotip belirleme, nükleik asit dizileme, gen ifadesi analizi gibi birçok uygulamada kullanılır. Ayrıca, tıbbi tanı ve kriminalistikte de yaygın olarak kullanılmaktadır.
Sonuç olarak, PCR, DNA polimeraz enzimi tarafından katalizlenen bir moleküler tekniktir. Bu teknik, özel olarak tasarlanmış primerlerin kullanımıyla, hedef DNA bölgesinin milyonlarca kopyasının üretilmesine izin verir. PCR, genetik analizlerde ve tıbbi tanıda önemli bir araç olarak kullanılmaktadır.
PCR da primer ne işe yarar?
Primerler: kopyalamak istediğiniz DNA bölümünün her iki tarafına bağlanacak şekilde tasarlanmış, PCR reaksiyonunu başlatmak için kullanılan kısa DNA dizileri. dNTP’ler: (DNA nükleotid bazları), DNA bazları (A, C, G ve T) DNA’nın yapı taşlarıdır ve yeni DNA zincirini oluşturmak için gereklidir.13 Nis 2020
PCR da kullanılan katalizörün adı nedir?
bakterisinden izole edilen ve ısıya dayanıklı enzim olan Taq polimeraz kullanılmaktadır.
PCR ve Taq polimeraz enzimi nedir?
PCR yöntemi bir organizmadan total genomik DNA eldesi ile başlar. DNA, bölgeye-özgü primerler (site-specific primer; bölgeye özgü dizayn edilmiş sentetik oligonükleotidler), Taq polimeraz (yüksek sıcaklıklarda da işlev gören, yeni nükleotidlerin eklenmesinde işlev gören bir enzim.16 Kas 2020
PCR testi neyi gösterir?
PCR (Polymerase Chain Reaction), DNA içerisinde yer alan, dizisi bilinen iki segment arasındaki özgün bir bölgeyi enzimatik olarak çoğaltmak için uygulanan tepkimelere verilen ortak bir isim olarak tanımlanmaktadır. PCR bir tanı testi olarak bilinmektedir ve koronavirüste de virüse ait RNA’yı göstermektedir.6 Eyl 2021
